期刊简介

               《岭南现代临床外科》杂志系由广东省卫生厅主管、广东省医学学术交流中心主办、中山大学孙逸仙纪念医院承办的专业期刊,国际标准刊号:ISSN 1009-976X,国内统一刊号:CN 44-1510/R。杂志创刊于1995年,面向全国公开发行出版,现为中国核心期刊(遴选)数据库和中国学术期刊综合评价数据库统计源收录,是一本集权威性、科学性、创新性、实用性和收藏性为一体的学术刊物。杂志以普通外科为主,涵盖骨外科、心胸外科、泌尿外科、神经外科、血管甲状腺外科、乳腺外科、整形外科、小儿外科和外科急危重病救治等广泛学术领域,以从事外科领域临床、科研、教学工作的各级医师和科研人员为读者对象。现设栏目:述评、专家笔谈、论著、短篇论著、临床研究、综述、新技术、新进展、病例报告、术式讨论、学术争鸣、经验交流等。本刊办刊宗旨:全面系统地反映我国外科专业的学术动态,及时报道外科临床及科研新理论、新技术、新进展,努力促进我国临床外科的学科发展和学术交流。                

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  • 杂志名称:岭南现代临床外科杂志
  • 主管单位:广东省卫生厅
  • 主办单位:广东省医学学术交流中心
  • 国际刊号:1009-976X
  • 国内刊号:44-1510/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
岭南现代临床外科杂志2016年第03期

构建Alb启动子调控HBEGF肝特异性表达的慢病毒载体及其功能验证

贾俊双;陈傍柱;林霞;刘宇;肖东;林晓琳

关键词:ALB, HBEGF, copGFP, 慢病毒载体
摘要:目的 构建肝特异性Alb(白蛋白)启动子调控HBEGF(Heparinbinding-epidermal growth factor)表达的慢病毒载体pLV-ATTG.方法 首先以pAlb-Cre-GH/BS为模板,PCR扩增目的基因Alb-enhancer/promoter,In-Fusion克隆至Not Ⅰ酶切的pTRECK6-GFP中,获得pAlbTRECK6(TRECK:toxin receptor-mediated conditional cell knockout);接着以pAlb-TRECK6为模板,PCR扩增Alb-TRECK6,In-Fusion克隆至Xba Ⅰ/BamH Ⅰ酶切的pCD823A-1载体(该载体已卸去EF-1α启动子)中,获得终的慢病毒载体pLV-ATTG,所构建的质粒均经测序和酶切鉴定.然后按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装.包装成功的慢病毒LV-ATTG感染肝癌细胞株BEL-7402细胞,倒置荧光显微镜检测copGFP表达,并收集细胞提取总RNA,以检测HBEGF表达.结果 酶切鉴定和测序证实成功构建了慢病毒载体pLV-ATTG;LV-ATTG感染BEL-7402细胞后,倒置荧光显微镜下可见绿色荧光,同时qRT-PCR检测结果显示HBEGF转基因能够正常表达.结论 成功构建Alb启动子调控HBEGF表达的慢病毒表达载体,为相关后续研究奠定了坚实基础.