期刊简介
《岭南现代临床外科》杂志系由广东省卫生厅主管、广东省医学学术交流中心主办、中山大学孙逸仙纪念医院承办的专业期刊，国际标准刊号：ISSN 1009-976X，国内统一刊号：CN 44-1510/R。杂志创刊于1995年，面向全国公开发行出版，现为中国核心期刊（遴选）数据库和中国学术期刊综合评价数据库统计源收录，是一本集权威性、科学性、创新性、实用性和收藏性为一体的学术刊物。杂志以普通外科为主，涵盖骨外科、心胸外科、泌尿外科、神经外科、血管甲状腺外科、乳腺外科、整形外科、小儿外科和外科急危重病救治等广泛学术领域，以从事外科领域临床、科研、教学工作的各级医师和科研人员为读者对象。现设栏目：述评、专家笔谈、论著、短篇论著、临床研究、综述、新技术、新进展、病例报告、术式讨论、学术争鸣、经验交流等。本刊办刊宗旨：全面系统地反映我国外科专业的学术动态，及时报道外科临床及科研新理论、新技术、新进展，努力促进我国临床外科的学科发展和学术交流。
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首页>岭南现代临床外科杂志
- 杂志名称：岭南现代临床外科杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学学术交流中心
- 国际刊号：1009-976X
- 国内刊号：44-1510/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
人FoxA1基因重组慢病毒载体的构建和鉴定
蒋雯丽；邓小耿；伍耀豪；曾乐祥；邱荣林；邓洁敏；周嘉嘉；张杰；陈子月
关键词：FOXA1, 慢病毒, 载体构建, 过表达
摘要：目的 构建叉头盒蛋白A1(Forkhead-boxA1,FoxA1)的重组慢病毒表达载体,为探究其功能和作用机制奠定基础.方法 设计基因引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增出FoxA1的cDNA序列,然后将其克隆至PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP-puro慢病毒表达载体上,经PCR、双酶切反应及DNA测序鉴定,将阳性重组FoxA1表达载体、pCMV-VSV-G和pCMV-dR8.91包装质粒共转染到HEK-293T细胞进行病毒包装收集病毒浓缩液,然后再感染293T细胞,通过观察绿色荧光蛋白来计算病毒滴度,后用病毒转染原代培养人皮肤成纤维细胞(HFFs),通过实时荧光定量PCR检测FoxA1 mRNA的表达水平.结果 重组慢病毒表达载体FoxA1经PCR扩增、酶切及测序鉴定正确,并得到滴度为1×108 TU/mL的病毒液,病毒感染人皮肤成纤维细胞后表达显著增强.结论 成功构建了人FoxA1重组慢病毒载体,并可在HFFs内高效表达,为后续FoxA1的功能和机理研究奠定了实验基础.
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